快速石蜡切片
一、电炉隔水加热法
- 将薄小(10X10X2mm)的组织放入 40%甲醛的小烧杯中,烧开 10 秒,然后移去酒精灯,再固定 1 分钟
- 用手术刀将组织修成 1 毫米左右厚的薄片,再放回 40%的甲醛(热)溶液内 1 分钟
- 将组织取出,水洗
- 用滤纸压干组织中的水份
- 再放入水浴的纯丙酮中 4 ~ 6 分钟(中间更换一次丙酮)水温控制在 70℃ 左右
- 轻压组织有弹性感后,放入 60 ~ 70℃ 的石蜡中浸蜡 5 分钟
- 用加热的电烙铁将组织嵌入事先准备好的空蜡块中,用载玻片压平组织,放在冰上冷却
- 常规石蜡切片,轻轻的将蜡块修至组织面完全暴露后,切片,切片厚度 4 ~ 5 微米,修片时不能修的太厚,否则组织容易蹦出。
- 将切片捞于载玻片后加热烤片 10 ~ 15 秒,烤片温度不宜超过 80℃,更不能将组织烤焦,可边烤边用湿布磨擦载玻片反面降温
- 快速放入二甲苯快速脱蜡(2 道),梯度酒精洗,入水
- 苏木素滴加在载玻片上,加热 1 ~ 2 分钟(60℃ 左右,不能将苏木素烧开,以防切片脱落)
- 水洗
- 盐酸酒精分化 1 秒钟
- 水洗,温水蓝化
- 伊红 2 ~ 5 秒钟
- 梯度酒精快速脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 注意事项:由于丙酮极易挥发燃烧,使用电炉隔水加热法必须时刻注意安全
二、超声波快速处理仪法
- 先将超声波快速处理仪开机预热至 70℃
- 将薄小(10X10X2mm)的组织放入 40%的甲醛或 AAF 液的小烧杯中超声处理 4 分钟
- 用手术刀将组织修成 1 毫米左右厚的薄片,再放回固定液内 2 分钟
- 取出组织,水洗 10 秒钟,放在滤纸上吸干
- 放入纯丙酮中超声处理 2 ~ 3 分钟,取出组织,放在滤纸上吸干,再放入纯丙酮 4 ~ 6 分钟,直至组织上浮
- 放入二甲苯中超声处理 3 分钟
- 放入熔融的石蜡中(70℃)超声处理 5 分钟,可用镊子轻压组织,直至无气泡产生
- 用加热的电烙铁或镊子将组织嵌入事先准备好的空蜡块中,用载玻片压平组织,放在冰上冷却
- 常规石蜡切片,轻轻的将蜡块修至组织面完全暴露后,切片,切片厚度 4 ~ 5 微米
- 将切片捞于载玻片后加热烤片 10 ~ 15 秒,烤片温度不宜超过 80℃,更不能将组织烤焦,可边烤边用湿布磨擦载玻片反面降温
- 快速放入二甲苯快速脱蜡(2 道),梯度酒精洗,入水
- 苏木素滴加在载玻片上,加热 1 ~ 2 分钟(60℃ 左右,不能将苏木素烧开,以防切片脱落)
- 水洗
- 盐酸酒精分化 1 秒钟
- 水洗,温水蓝化
- 伊红 2 ~ 5 秒钟
- 梯度酒精快速脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。