伊红配法
二、伊红
伊红(水溶性) 配方: 伊红 (水溶性) 2 .5 -5g 蒸馏水 500 ml 将水溶性伊红溶于蒸馏水中,然后加浓盐酸 10 毫升,充分搅拌,静置过夜后过滤。过滤后的沉淀用蒸馏水冲洗二次,再过滤;将沉淀物连同滤纸一起放入温箱内干燥,加 95%酒精 1000 毫升,配成饱和液。使用前再用 95%的酒精 1:1 ~ 2 倍稀释,加入 1 ~ 2%冰醋酸(促染剂:只能增加染料的着色能力,但不参与染色反应的物质) 此方法具有染色时间快,颜色鲜艳,不容易褪色,使用寿命长等特点。
伊红(醇溶性) 配方: 伊红 (醇溶性) 2.5-5 g 95%酒精 1000 ml 加冰醋酸 10 滴(0.5ml),冰醋酸过多,可导致染浆时细胞核酸化。 伊红的染色速度,与其 pH 值相关,pH 越酸,染色速度越快,pH 在 3.5 左右,染色时间只需 2-3 秒,当 pH 在 6.5 左右,染色时间要 2-3 分钟。由于胞浆的等电点 pH 为 4.7-5.0,故伊红 pH 以 4.5 左右为适。 我们在日常工作中 1000 ml95%酒精中加 0.8 g 醇溶性伊红,机器染色 1000 张切片左右(每天)更换,结果更稳定。
冷冻切片 →