宫颈脱落细胞学样本的制备

女性生殖道细胞学样本的制备有三个重点:一是要采集到有病变部位的细胞,二是要把采集到的细胞转移到玻璃片上,三是玻璃片上的细胞在显微镜下可以观察并能作出正确诊断。完成这项工作就必须具备一个经验丰富的妇科医生,一个先进的取材工具、制片方法和一个优秀的病理科医生。
一、  传统宫颈采集法:
用窥阴器(用于成人,儿童用鼻窥器)暴露宫颈,用木质铲形小脚刮板在宫颈外口(鳞、柱状上皮交界处)为圆心,将小脚刮板轻轻刮取一周,若白带过多,应先用无菌干棉球轻轻擦净粘液,再刮取标本,然后均匀地涂布于玻璃片上,立即放入 95%酒精液内固定。也可以在糜烂等可疑病变部位直接刮片。后穹隆吸片是利用带橡皮球的吸管在后穹隆吸取,将吸取物喷在玻璃片上,向一个方向轻轻涂抹,立即放入 95%酒精液内固定。而检查内分泌水平的,取材最佳部位为阴道侧壁的上 1/3 处涂片,其次是阴道后穹隆部位;未婚女性可在小阴唇内侧壁取材。
二、  液基细胞采集法:
用窥阴器(用于成人,儿童用鼻窥器)暴露宫颈,使用专用的宫颈采样刷置于宫颈口,将宫颈刷插入子宫颈内,直到只有刷子最下面的刷毛暴露在子宫颈外口为止,慢慢地将宫颈刷向同一方向 360 度转 2-3 圈并停留数秒,也就是说,直立的毛刷与移行区抵牢,刮片边缘始终与宫颈上皮表面紧密接触;然后将带有足够数量细胞的塑料刮刷放入装有细胞保存液的小瓶内,并快速地搅动十次左右,以便洗脱刮刷上的大量细胞,为保证足够的细胞量,然后将宫颈刷的刷头放在保存液瓶内,并拧紧瓶盖。送检至病理科,用机器完成制片。
   注意事项:

  1. 在做宫颈取样前 24 小时内不能同房、盆浴、阴道冲洗和使用阴道塞剂。
  2. 避免在月经期间取样。
  3. 宫颈急性发炎期,应先请医生药物治疗后再取样。
  4. 宫颈刚做过手术治疗时,如冷冻治疗、电烧、切片、锥切、激光治疗等应避免取样。
  5. 医生在做宫颈取样前应避免使用醋酸或其他试剂。
  6. 医生在擦拭粘液时要注意不能擦的太重,过于干净,否则会影响刮片的细胞量。
    与传统宫颈采集法相比,液基细胞采集法具有能够更容易采集到病变标本、并把病变细胞均匀、薄层地转移至玻璃片上等优点,大大提高了宫颈疾变的检出率。
    三、巴氏染色法:
  7. 涂片固定 15- 30 分钟
  8. 苏木素染色 2-10 分钟
  9. 水洗
  10. 1%盐酸酒精分化数秒
  11. 水洗,镜下观察,深浅适当后流水蓝化
  12. 80%酒精脱水
  13. 95%酒精脱水
  14. 桔黄 G6 染 15-30 秒
  15. 95%酒精迅速洗涤二、三次
  16. 在 EA36 或 EA50 中染数秒至几分钟,镜下胞浆着色鲜艳为止。     
    (根据每个人的配制不同,染色时间差异很大)
  17. 95%酒精迅速洗涤二、三次,洗去多余的颜色
  18. 无水酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。
        本法染色特点是细胞具有多色性颜色,色彩鲜艳多彩。涂片染色的透明性好,胞质颗粒分明,胞核结构清晰,如鳞状上皮过度角化细胞胞质呈橘黄色;角化细胞显粉红色;而角化前细胞显浅绿色或浅蓝色,适用于妇科细胞学诊断和观察阴道涂片中激素水平对上皮细胞的影响。