免疫组织化学染色方法(直接法)

  1. 组织切片常规脱蜡入水。    2. 胰酶或胃蛋白酶消化,37℃ 30 分钟点。
  2. 水洗。    4. 0.3%H2O2 甲醇液:阻断内源性过氧化物酶(198 毫升甲醇或水+2 毫升 30% H2O2)20 分钟。(冰冻切片、细胞涂片从此步骤开始)    5. 水洗后经 PBS 洗 2-3 次。    6. 滴加正常血清 37 ℃,20 分钟。    7. 甩去血清,加酶标记抗体,37℃ 30 分钟。置温盒内。    8. PBS 洗 3 次。    9. 显色。显微镜下观察控制呈色反应,以结果清晰,背景无非特异性染色为度。    10. 自来水充分冲洗。    11. 必要时苏木素复染胞核。    12. 封片。若用 DAB 呈色,需经酒精脱水,二甲苯透明,树胶封片。若用 AEC 等则不能用酒精脱水,用吸水纸去周围组织多余的水份,直接将水溶性封片剂封片。