网状纤维

Gomori 氏银氨液配制法  配法:
  10%硝酸银               10 ml        
  10%氢氧化钾              20 ml
     将 3 毫升 10%硝酸银溶液与 1 毫升 10%氢氧化钾溶液混合,马上产生黑色沉淀,加蒸馏水 100 毫升,摇晃,倒去棕黑色的上清液,留下黑色沉淀物(5 毫升),反复几次,直至加下去的蒸馏水不再混浊为止,然后,倒去上清液(留 5 毫升),滴加浓氨水,直至黑色沉淀溶解(边滴加,边摇晃,氨水不能过量),如氨水过量,可再滴加 10%硝酸银,直至出现黑色沉淀。最后,加蒸馏水至 40 毫升,置于棕色瓶中,4 度冰箱内保存备用。此液以新配效果最好,4 度冰箱内可保存 15 ~ 30 天。
  染色步骤:

  1. 切片脱蜡至蒸馏水。
  2. 放入 0.25%高锰酸钾水溶液 5 分钟。
  3. 蒸馏水洗。
    4.2.5%草酸 2 ~ 5 分钟。(切片变白就可以)
  4. 蒸馏水洗 2 次。
  5. 放入 2%铁明矾水溶液 10 分钟。
  6. 蒸馏水洗多次。(要洗干净)
  7. 氨银液浸染 3 ~ 5 分钟。(根据室温)
  8. 蒸馏水浸洗 2 次。(快速)
  9. 放入 10%福尔马林液中还原 3 分钟.
  10. 自来水洗,再用蒸馏水洗。
  11. 用 0.2%氯化金水溶液调色 5 ~ 10 分钟,蒸馏水洗。。
  12. 2%硫代硫酸钠水溶液固定 1 分钟。(可不用)
  13. 水洗,酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。
    结果:网状纤维黑色,胶原纤维深黄色。

注意事项:

  1. 使用的玻璃器皿都必须干净,并用蒸馏水冲洗,全过程最好用双蒸水。
  2. 所用的试剂如硝酸银,氢氧化钠和氢氧化钾等的质量要纯。
  3. 配制银氨液时加浓氨水要适量,边加边摇动使沉淀物溶解至肉眼仅能见到一些微粒为止,加入过多,容易导致脱片。
  4. 切片经硫酸铁铵液和银氨液作用后水洗时间要恰当。
  5. 配好后的银氨液很敏感,受光或空气作用后均易解离析出银盐,故应用棕色玻璃瓶盛装并置于冰箱保存。
  6. 在经 10%中性甲醛液还原流水冲洗后,放在显微镜下观察。如浸银过度,可用高锰酸钾水溶液分化短时再经流水冲洗,如浸银不足,可用蒸馏水洗后,再滴上银氨液,有可能可以补救。