糖原
过碘酸-Schiff(PAS)染色法
试剂配制:
碱性品红 1 g ,活性炭 2 g ,当量盐酸 20 ml ,偏重亚硫酸钠 1.5 g
Schiff 试剂配制:
- 碱性品红 1g,放入 200 毫升蒸馏水中,煮沸,搅拌,充分溶解。
- 冷却至 50℃ 时过滤,滤液中加入当量盐酸 20 毫升。
- 加偏重亚硫酸钠 1.5 g,置于暗处过夜。
- 加活性炭 2 g,摇晃,过滤,以无色为最佳。棕色瓶,4℃ 冰箱保存。
所谓 Schiff’s 试剂冷配法,就是将热配法的配方,依次加入容器,用震荡器震荡 2 小时,然后加活性炭 1 克,震荡 10 分钟,过滤便可使用。
染色步骤:
- 切片脱蜡至蒸馏水。
- 1%过碘酸水溶液 5-10 分钟。
- 蒸馏水洗多次。
- Schiff 液 10-15 分钟。
- 0.5%偏重亚硫酸钠 (钾)水溶液洗 2 次(1-2 分钟)
- 流水冲洗 10 分钟。
- 苏木素复染。(1-2 分钟)
- 酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。
结果:糖原红色。
注意:1. 阴性对照片用淀粉酶消化处理。
2. 糖原容易水解,取材标本最好新鲜,不要经过水洗。
3. 固定液用中性福尔马林为佳。
4. 如 Schiff 液发红, 再加入少量偏重亚硫酸钠,使液体颜色变清后又可使用.
糖原染色的应用: - 鉴定肝糖原,肌糖原;观察某些代谢疾病。除此之外,
由先天遗传缺陷引起的糖原累积病时,在肝、肾、心肌或骨
骼肌等均有大量糖原沉积。 - 显示多种真菌的菌丝及孢子。