基底膜
六胺银法(改良的 Grocott,1955;Jones,1957) 试剂配制:
- 0.5%高碘酸水溶液:高碘酸 0.5g,蒸馏水加至 100ml
- 0.5%偏重亚硫酸钠溶液:偏重亚硫酸钠 0.5g,蒸馏水加至 100ml
- 8%铬酸水溶液:铬酸 8g,蒸馏水加至 100ml
- Gomori 氏六胺银贮备液:5%硝酸银液 5ml,3%六次甲基四胺 100ml 将 5%硝酸银液慢慢加入 3%六次甲基四胺水溶液中,即形成乳白色沉淀,在摇动中沉淀溶解变清,澄清液盛于棕色小口砂塞瓶内,置于 4℃ 冰箱保存待用。
- 5%四硼酸钠水溶液:四硼酸钠 5g,蒸链馏水加至 100ml
- 六胺银工作液:Gomori 氏六胺银贮备液 10ml,蒸馏水 25ml ,5%四硼酸钠水溶液 2ml。先将四硼酸钠液加入蒸馏水中,然后加入 Gomori 氏六胺银贮备液,混合均匀后即可使用。 操作方法:
- 常规脱蜡至水。
- 0.5%高碘酸氧化 15 分钟。
- 流水冲洗 5 分钟。
- 8%铬酸氧化 30 分钟。
- 流水稍洗。
- 1%偏重亚硫酸钠液处理 1 分钟。
- 流水冲洗 5 分钟,再用蒸馏水洗。
- 切片放入预热 60℃ 的六胺银工作液中,于 60℃ 恒温箱内作用 30-60 分钟,直至见到切片在黄棕色的背景中见有黑色反应时,取出切片,蒸馏水洗后镜下检查,以肾小球毛细血管基底膜出现黑色的银沉淀为标准。如着色不够深,可用蒸馏水冲洗后再放回六胺银工作液中继续作用。
- 蒸馏水稍洗。
- 0.1%氯化金水溶液调色 2 分钟。
- 蒸馏水稍洗。
- 3%硫代硫酸钠液处理 3 分钟。
- 自来水冲洗 5 分钟。
- 用苏木素作对比染色。
- 各级酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 结果:肾小球囊基底膜和肾毛细备管球基底膜呈黑色。霉菌、弹力纤维及一些网状纤维也呈黑色。